ADRIANA PATRICIA ROJAS MORENO
OLGA MARÍA MORENO NIÑO
FERNANDO SUÁREZ OBANDO
CITOGENÉTICA
EDITORES ACADÉMICOS METODOLOGÍAS
Y PROTOCOLOS
Citogenética
Metodologías y protocolos
Citogenética
Metodologías y protocolos
ADRIANA PATRICIA ROJAS MORENO OLGA MARÍA MORENO NIÑO
FERNANDO SUÁREZ OBANDO
Editores académicos
Reservadostodoslosderechos
©PontificiaUniversidadJaveriana
©AdrianaPatriciaRojasMoreno,Olga MaríaMorenoNiñoyFernandoSuárez Obando,editoresacadémicos
©Variosautores
Primeraedición:Bogotá,abrilde2026
ISBN:(impreso)978-628-502-112-1
ISBN:(digital)978-628-502-113-8
DOI:https://doi.org/10.11144/Javeriana. 9786285021138
Númerodeejemplares:300
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EditorialPontificiaUniversidadJaveriana Carrera7.ªn.º37-25,oficina1301 Bogotá,EdificioLutaima Teléfono:3208320,ext.4205 www.javeriana.edu.co/editorial editorialpuj@javeriana.edu.co
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PontificiaUniversidadJaveriana.BibliotecaAlfonsoBorreroCabal,S.J. Catalogaciónenlapublicación
RojasMoreno,AdrianaPatricia,autora,editoraacadémica Citogenética : metodologías y protocolos / autores, Adriana Patricia Rojas Moreno [y otros] ; editores académicosAdrianaPatriciaRojasMoreno,OlgaMaríaMorenoNiño,FernandoSuárezObando.–Primera edición.–Bogotá:EditorialPontificiaUniversidadJaveriana,2026.
290páginas;17×24cm.
ISBN:978-628-502-112-1(impreso)
ISBN:978-628-502-113-8(electrónico)
1.Citogenética2.Biologíamolecular3.Genomahumano4.Medicina5.Genética6.Biologíamolecular 7.Citología8.Citogenéticahumana8.CromosomasI.MorenoNiño,OlgaMaría,autora,editoraacadémica II.SuárezObando,Fernando,autor,editoracadémicoIII.PontificiaUniversidadJaveriana.Bogotá.
CDD572.8edición23
CO-BoPUJ 13/02/2026
Prólogo....................................................9
Introducción..............................................11
AdrianaPatriciaRojasMoreno,Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
METODOLOGÍAS Y PROTOCOLOS EN CITOGENÉTICA
Protocolo 1. Toma de muestra, siembra e incubación de linfocitos....................................15
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.,OlgaMaríaMoreno Niño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.yAdrianaPatriciaRojasMoreno, Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 2. Obtención de preparados cromosómicos............25
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.yOlgaMaríaMoreno Niño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 3. Cultivos sincronizados y obtención de bandeos de alta resolución...........................................33
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.yOlgaMaríaMoreno Niño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 4. Cultivos celulares para obtener cariotipo a partir de fibroblastos, restos ovulares o tumores sólidos................41
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.,OlgaMaríaMoreno Niño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.yAdrianaPatriciaRojasMoreno, Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 5. Cultivos celulares para obtener cromosomas a partir de líquido amniótico...................................55
ÁngelaPatriciaVergaraGarcía,Biol.,M.Sc.enToxicología
Protocolo 6. Bandeo cromosómico G..........................65
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 7. Bandeo cromosómico R de replicación tardía.........77
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.
Protocolo 8. Bandeo cromosómico C...........................85
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.
Protocolo 9. Hibridación in situ fluorescente (FISH)..............93
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.
METODOLOGÍAS Y PROTOCOLOS DE CITOGENÉTICA CONVENCIONAL PARA NEOPLASIAS ..........................119
Protocolo 1. Cultivo, procesamiento y análisis de muestras de médula ósea para el análisis citogenético de neoplasias hematológicas............................................121
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.yAnaShaia ClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.
Protocolo 2. Cultivo, procesamiento y análisis de muestras de tumores sólidos para estudio citogenético.....................133
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.yAdriana
PatriciaRojasMoreno,Bioq.,Msc,Ph.D.
METODOLOGÍAS ESPECIALIZADAS DE USO EN EL DIAGNÓSTICO Y LA INVESTIGACIÓN .........................141
Protocolo 1. Intercambio de cromátides hermanas (ICH).........143
AnaShaiaClavijoMoreno,Biol.,M.Sc.
Protocolo 2. Prueba citogenética para el diagnóstico de la anemia de Fanconi........................................151
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 3. Ensayo de micronúcleos con bloqueo de la citocinesis (CBMN)........................................163
CamilaBernalForigua,Bact.,M.Sc.,c.Ph.D.
yAdrianaPatriciaRojasMoreno,Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
Protocolo 4. Ensayo de cometa en condiciones alcalinas.........171
ÁngelaPatriciaVergaraGarcía,Biol.,M.Sc.enToxicología
NOMENCLATURA
Estructura del cromosoma y nomenclatura para la descripción de resultados en citogenética clásica...............181
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol,M.Sc.,Ph.D.
Nomenclatura en la descripción de resultados por hibridación in situ fluorescente..............................201
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol,M.Sc.,Ph.D.
APROXIMACIÓN A LA CITOGENÉTICA
MOLECULAR: MLPA Y CGH ..................................217
Aproximación a la citogenética molecular: MLPA y CGH.........219
OlgaMaríaMorenoNiño,Biol.,M.Sc.,Ph.D.yAdriana
PatriciaRojasMoreno,Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
Seguridad y normatividad en el laboratorio....................231
ÁngelaPatriciaVergaraGarcía,Biol.,M.Sc.enToxicología
CITOGENÓMICA: USO EN INVESTIGACIÓN Y DIAGNÓSTICO GENÉTICO .................................243
Citogenómica: uso en investigación y diagnóstico genético.......245
JuanCarlosPrietoRivera,MD,M.Sc.enBiología
Referencias...............................................255
Anexo...................................................281
Las disciplinas científicas se consolidan no solo por la acumulación de conocimientos, sino por la voluntad de quienes, en la academia, deciden organizar, sistematizar y proyectar ese saber hacia nuevas generaciones. Citogenética: metodologías y protocolos es expresión de la construcción conjunta y de un compromiso intelectual y formativo. Más que un compendio técnico, esta obra representa el resultado de un proceso colectivo de reflexión, experiencia docente y práctica especializada en el campo de la citogenética humana.
La génesis de este libro se remonta al año 2016, cuando, en el seno del Instituto de Genética Humana, surgió la iniciativa de construir un texto que reuniera, de manera rigurosa y didáctica, los fundamentos conceptuales y los procedimientos técnicos que sustentan el trabajo citogenético contemporáneo. La idea fue concebida por los doctores Fernando Suárez Obando, Adriana Patricia Rojas Moreno y Olga María Moreno Niño, profesores e investigadores comprometidos con la formación en ciencias básicas y clínicas. Desde su origen, el proyecto tuvo un horizonte claro: ofrecer una obra académica sólida que integrara la experiencia acumulada en el laboratorio con la rigurosidad metodológica exigida por la práctica diagnóstica e investigativa.
El proceso de escritura, que se extendió hasta el año 2025, estuvo marcado por el diálogo interdisciplinario y la construcción colaborativa entre sus autores. Cada capítulo fue concebido no solo como una guía técnica, sino como un espacio de articulación entre teoría y práctica, donde la precisión metodológica se acompaña de criterios de calidad, estandarización y responsabilidad científica. El resultado es un texto que refleja madurez académica, coherencia interna y una clara vocación formativa.
Este prólogo no puede eludir el reconocimiento especial a la memoria del profesor Fernando Suárez Obando, quien falleció el 15 de agosto de 2023.
Su liderazgo intelectual, su visión institucional y su convicción sobre la necesidad de consolidar una obra de referencia en citogenética fueron el impulso inicial y permanente de este proyecto. Aunque no alcanzó a ver el texto publicado, su impronta permanece en cada sección del libro. Para quienes participaron en su elaboración, la culminación de esta obra constituye también la materialización de un anhelo suyo largamente acariciado.
Igualmente quiero agradecer el liderazgo de la Dra. Adriana Patricia Rojas Moreno, investigadora en este importante campo de la ciencia y líder de proyectos; y a la Dra. Olga María Moreno Niño, quien fuese investigadora del Instituto de Genética Humana. De ellas resalto su dedicación y determinación para culminar el sueño que iniciaron junto con el Dr. Fernando Suárez Obando, con el fin de dejar la huella que plantearon desde el inicio.
Así, este volumen se ofrece a la comunidad académica como testimonio de continuidad, compromiso y excelencia. En sus páginas convergen experiencia,disciplinayvocaciónpedagógica,conelpropósitodefortalecer la formación de estudiantes y profesionales que, desde el laboratorio y la clínica, contribuyen al avance responsable del conocimiento genético.
Carlos Gómez-Restrepo
Decano
FacultaddeMedicina
PontificiaUniversidadJaveriana
Introducción
Adriana Patricia Rojas Moreno,Bioq.,M.Sc.,Ph.D.
Con los avances científicos y biotecnológicos desarrollados a partir de los años setenta del siglo XX, se ha establecido en el mundo de la medicina y la biología que los cambios producidos en el genoma y las anomalías cromosómicas contribuyen de manera significativa al inicio y evolución de enfermedades con componente hereditario o no. Una de las disciplinas más antiguas que evalúa estas alteraciones en el genoma es la citogenética.
El surgimiento de la citogenética humana se sitúa en 1956, cuando Joe Hin Tjio y Albert Levan demostraron que las células somáticas normales humanas contienen 46 cromosomas. Dos años más tarde, Jerôme Lejeune y Raymond Turpin identificaron la trisomía del cromosoma 21 como el origen genético del síndrome de Down. Estos hallazgos marcaron el inicio de una sucesión constante y permanente de descubrimientos en el campo de la citogenética que hoy en día se mantiene vigente.
Su desarrollo como disciplina científica lo han impulsado avances de la biología molecular y la biotecnología. En el tiempo, se ha evidenciado una progresión en las técnicas utilizadas en citogenética que han demostrado utilidad tanto en la investigación como en el diagnóstico clínico. De esta manera, se ha observado la integración de técnicas moleculares complementarias a la citogenética convencional, como la hibridación fluorescente in situ (FISH), la amplificación de sondas tras ligación múltiple (MPLA), la hibridación genómica comparada (array CGH) y, más recientemente, el mapeo óptico del genoma (OGM).
En el presente libro se describen los protocolos y metodologías propias de lacitogenéticaconvencionalymolecular,abordandosuaplicaciónencasos desospechadeenfermedadesrelacionadasconalteracionescromosómicas y génicas en enfermedades genéticas, enfermedades relacionadas con fallos en los mecanismos de reparación del ADN, neoplasias hematológicas, neoplasias en tejidos sólidos, anemia de Fanconi, entre otras. En
cada capítulo se describen los fundamentos de las técnicas, los reactivos, los materiales y los procedimientos necesarios para su implementación en el laboratorio. De igual manera, se dedican dos capítulos a describir explícitamente la nomenclatura vigente para la notación normalizada para citogenética convencional y FISH. Finalmente, se aborda la importancia de la citogenética en el diagnóstico de enfermedades con componente hereditario.
El contenido del libro fue desarrollado por un grupo interdisciplinar de profesionales de las ciencias básicas y las ciencias clínicas, en quienes el común denominador fue su experiencia e interés constante por la citogenética. Cada uno de ellos dejó su impronta académica en el desarrollo de los capítulos y ahora se refleja en todo este libro que, esperamos, sea de utilidad para estudiantes y profesionales de las áreas de las ciencias básicas y clínicas.
Este libro se compuso usando tipos Erewhon, con el sistema de composición tipográfica ConTEXt. Se terminó de imprimir en los talleres de DGP Editores S.A.S. en abril de 2026.
Citogenética: metodología y protocolos es un libro que profundiza en una disciplina fundamental para comprender la estructura y la función de los cromosomas en el contexto clínico humano. A lo largo de sus capítulos, se presentan diferentes protocolos y metodologías de citogenética clásica, citogenética molecular y citogenómica, para mostrar su utilidad en el diagnóstico y seguimiento de enfermedades en las que la integridad del genoma es determinante. La idea de este libro surgió en el Instituto de Genética Humana de la Facultad de Medicina de la Pontificia Universidad Javeriana, durante la ejecución de un proyecto de investigación en el que tres académicos decidieron trasladar su pasión y experiencia sobre la citogenética. Esta idea se materializó en este libro, destinado a acompañar y enriquecer el trabajo de estudiantes, investigadores y profesionales.