1.3.4.
Cząsteczki odwzorowane na polimerach (molecular imprinted polymers, MIP)
wzornik epitopu polimer z ‘odciskiem’ epitopu
wolne miejsce wiążące
odciskanieusunięcierozpoznanie epitopu
Rycina 1.5.
molecular imprinted polymers
Tabela 1.3. molecular imprinted polymers
AptameryMIP
OligonukleotydySyntetyczny polimer
Pojedyncze nici DNA i RNAPolimer
poliklonalne
produkcyjny rozpoznawania analitu
System immunologiczny
biologicznego, trudno
i nieimmunogennych substancji docelowych
NieimmunogenneNieimmunogenne
Bardziej stabilne w wysokiej
regenerowane po denaturacji
zachodzi in vitro
Proces przeprowadzany in vitro
struktur
rozpoznawana.
1.4. Znaczniki w metodach immunochemicznych
analitu (substancji docelowej), czyli krzywej kalibracyjnej wyznaczonej dla kalibra(immunoradiometric assay
tych metod.
1.4.1. Znaczniki enzymatyczne
i sensorach elektrochemicznych.
w immunochemii to: peroksydaza chrzanowa (horseradish peroxidasetaza alkaliczna (alkaline phosphatase Cu2+
nych w reakcjach katalizowanych przez znacznik enzymatyczny.
Enzym
Substrat (bezbarwny) Produkt (barwny)
Enzym
Substrat
Rycina 1.6. enzymatyczny.
Chemiluminescencja
Fluorofor Wzbudzenie
Fluorescencja
Koloidalna nanocząstka złota
Różne barwy
1.4.2. Znaczniki chemiluminescencyjnereakcyjnej dodawany jest luminol-nadtlenek wodoru w celu wygenerowania syg-
chemiluminescencyjne (chemiluminescence immunoassay, CLIA).
chemicznie ze stabilnego prekursora na powierzchni elektrody (elektrochemi-
tripropylamine, TPrA). Produkt utlenienia TPrA reaguje z Ru(bpy)32+
(carcinoembrionic antigen, CEA; alpha-fetoprotein (human chorionic gonadotropin, HCG).
Przeciwciało Łącznik
Analit
Ru(bpy)2+ hv eeelektroda 3
Ru(bpy)3+ 3
Produkt TPrA*+ TPrA* H+
[Ru(bpy)2+ ]* 3 TPrA
Rycina 1.7.
TPrA – tri-n-propyloamina. -
sowania takich metod w systemach POCT.
lub elektrochemiczne (potencjometryczne, amperometryczne, konduktometryczne, woltametryczne, impedancja).
1.4.3. Transfer energii rezonansowej
niesienia energii (Förster resonance energy transfer
(ryc. 1.8).
wzbudzenie emisja FRET
Nanocząstka fluorescencyjna
Przeciwciało sprzężone z akceptorem energii
Przeciwciało wychwytujące
Rycina 1.8. rezonansowego przeniesienia energii (Förster resonance energy transfer, FRET).
W innych metodach immunochemicznych stosowane jest chemiluminescencyjne rezonansowe przeniesienia energii (chemiluminescence resonance energy transfer,bioluminescence resonance energy transfer-dzie FRET dystans pary donor–akceptor jest ograniczony do 10 nm (ryc. 1.9).
i TSH-R-Ab w tarczycy.
Anty-TPO – przeciwciała przeciwko peroksydazie tarczycowej
Anty-Tg – przeciwciała przeciwko tyreoglobulinie
TSHR-Ab – przeciwciała przeciwko receptorom TSH
Anty-TPOAnty-TPO
Anty-Tg
Rycina 10.1.
Peroksydaza tarczycowa
, H2O2
Utlenienie jodków
i powstawania jodotyronin
Zapalenie tarczycy Hashimoto
Peroksydaza tarczycowa
Łączenie jodotyronin
Anty-TG
Anty-TPO
Choroba Graves
Rycina 10.2.
Anty-TG
Anty-TPO
Przeciwciała przeciwko peroksydazie tarczycowej (TPOAb)
meto-
dami immunochemicznymi kompetycyjnymi lub niekompetycyjnymi i – jak
National Institute for Biological Standards and Controlrodowy standard (First International Standard Expert Committee on Biological Standardisation of the World Health Organisation 2021 r.).
Wykorzystywane na automatach immunochemicznych metody oznaczania
granicy detekcji (limit of detectioncyjnego (upper reference limit
wynik oznaczenia (patrz rozdz. 2).
10.2.
International Reference
Preparation
do oznaczania TgAb wykorzystywane na automatach to metody niekompetycyjne,cut-off)
tyreoglobuliny przedstawiono w rozdziale 9.
10.3.
Przeciwciała przeciwko receptorom TSH (TSHR-Ab)
TSHR jest istotne.
GsGq
Proliferacja Synteza T4/T3
Metoda wiązania kompetycyjnego
Immunoglobulinyhamujące wiązaniedo receptoraTSH ( TSH-R-binding inhibitory immunoglobulin )
Neutralne
TSAb (stymulujące)
TBAb (hamujące) Immunoglobuliny stymulującereceptor TSH (TRH-R-stimulating antibodies ) Metoda biologiczna
Rycina 10.3.
i metody ich oznaczania.
1. Metody biologiczne.
znakowanego TSH do receptora TSH.
receptor TSH.
Metody hamowania kompetycyjnego
TRAB.
Metody biologiczne
TRSR-stimulating antibodies),
TSHR-stimulating immunoglobulin),
TSHT-stimulating antibodies),
TSH-R-blocking immunoglobulin).