Spis treści
1. Wprowadzenie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2. Krótka historia chromatografii . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3. Nauki omiczne (omiki) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4. Techniki biochromatograficzne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.1. Chromatografia cieczowa kolumnowa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.2. Chromatografia cienkowarstwowa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.3. Chromatografia gazowa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4.4. Chromatografia preparatywna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5. Przygotowanie próbek materiałów biologicznych do analizy chromatograficznej . . . . . . 5.1. Znaczenie przygotowania próbek do analizy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.2. Ogólne zasady przygotowania próbek do analizy . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3. Rodzaje próbek biologicznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4. Metody chromatograficzne w przygotowaniu próbek biologicznych do analizy . . . . . . . . . .
1 5 17 35 36 42 42 43 45 45 49 53 57
5.4.1. Chromatografia wykluczania . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.2. Chromatografia powinowactwa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
57 61
5.5. Wybrane procedury przygotowania próbek biologicznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
63
5.5.1. Wstępna filtracja próbek biologicznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.5.2. Precypitacja białek z próbek biologicznych przed oznaczaniem związków małocząsteczkowych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.5.3. Przygotowanie próbek do analizy białek w proteomice (procedura SPEED) . . . . . . . . . . . 5.5.4. Usuwanie fosfolipidów z próbek biologicznych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.5.5. Procedura ekstrakcyjna QuEChERS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
63 65 66 68 70
5.6. Klasyczne techniki ekstrakcji . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
72
5.6.1. Klasyczna ekstrakcja ciecz-ciecz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.6.2. Klasyczna ekstrakcja do fazy stałej . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
73 74
5.7. Techniki mikroekstrakcyjne . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
80
5.7.1. 5.7.2. 5.7.3. 5.7.4.
Mikroekstrakcja z wykorzystaniem rozpuszczalników . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Dyspersyjna mikroekstrakcja ciecz-ciecz . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Mikroekstrakcja cieczą wspomagana ciekłą membraną . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Mikroekstrakcja z wykorzystaniem sorbentów stałych . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Spis treści
81 82 84 87
V