Nuevos híbridos de mandarino King - I. Selección de patrones tolerantes a clorosis férrica

Nuevos híbridos de mandarino King - I Selección de patrones tolerantes a clorosis férrica Amparo Primo-Capella, María Ángeles Forner-Giner y Mary-Rus MartínezCuenca

Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA)

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2025

Nuevos híbridos de mandarino King – I Selección de patrones tolerantes a clorosis férrica Amparo Primo-Capella, María Ángeles Forner-Giner y Mary-Rus Martínez-Cuenca* *martinez_mru@gva.es Centro de Citricultura y Producción Vegetal, Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA)

Índice 1. Introducción .................................................................................................................... 1 2. Materiales y métodos ...................................................................................................... 1 2.1. Material vegetal y condiciones de crecimiento ................................................................. 1 2.2. Medición de la calidad externa .......................................................................................... 2 2.3. Concentración de clorofila ................................................................................................. 2 2.4. Parámetros de intercambio de gaseoso ............................................................................ 2 2.5. Análisis de hierro total ....................................................................................................... 2 2.6. Actividad reductora de la raíz ............................................................................................ 3 2.7. Acidificación de la raíz ........................................................................................................ 3 2.8. Análisis estadísticos ............................................................................................................ 3 3. Resultados ....................................................................................................................... 3 3.1. Crecimiento ........................................................................................................................ 3 3.2. Concentración de clorofila .................................................. ¡Error! Marcador no definido. 3.3. Parámetros de intercambio de gases ................................................................................. 4 3.4. Análisis de hierro total ....................................................................................................... 6 3.5. Actividad reductora de la raíz ............................................................................................ 6 3.6. Acidificación de la raíz ........................................................................................................ 6 4. Discusión ......................................................................................................................... 7

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Nuevos híbridos de mandarino King – I, Selección de patrones tolerantes a clorosis férrica

Resumen La clorosis férrica (Fe) es uno de los problemas más comunes para los cultivos en suelos calcáreos y los patrones son clave en la tolerancia de las plantas a este estrés abiótico. Este trabajo, a cargo del Grupo de Mejora* del Centro de Citricultura y Producción Vegetal del IVIA, evalúa la respuesta a la deficiencia de Fe de nuevos híbridos de cítricos de Mandarino King × P. trifoliata (en adelante 0501) en comparación con los patrones más utilizados en España: Citrus macrophylla (CM, tolerante a clorosis) y Carrizo citrange (CC, sensible). Tras someter las plantas durante 8 semanas a 20 µM (control, Ct) o 0 (deficiente en Fe, -Fe) FeEDDHA, se evaluó su crecimiento, concentración de Fe, parámetros fotosintéticos, actividad reductora y acidificadora del sistema radical (enzima FC-R y extrusión de protones, respectivamente). Algunos híbridos -Fe presentaron marcada sintomatología de clorosis férrica, como disminución de la relación raíz:parte aérea y clorofilas. Los efectos más notables se registraron en los genotipos 050119, 050124-B y 050110. El tratamiento -Fe redujo la fotosíntesis de las hojas de las especies 05019, 050131, 050125, 050112 y 05013, y la conductancia estomática en los híbridos 050120, 050125, 050112 y 050124-B. La deficiencia de Fe aumentó la actividad FC-R y la extrusión de H+ en CM y los híbridos 050114, 05019, 050131 y 050125, lo que hace a estos genotipos como posibles materiales tolerantes a clorosis en condiciones de invernadero, debiéndose determinar su comportamiento en campo y, sobre todo, estudiar su influencia sobre las variedades injertadas. Palabras clave: Deficiencia, Hierro, Fotosíntesis, Pigmentos fotosintéticos, Programa de mejora * El grupo de mejora de patrones de cítricos del IVIA obtiene poblaciones de nuevos materiales híbridos de cítricos con potencial tolerancia a los principales estreses abióticos de la Comunidad Valenciana (salinidad, condiciones calizas y de encharcamiento). Tras la obtención y crecimiento de las plantas, el siguiente paso es la evaluación, selección preliminar en condiciones controladas de invernadero e identificación de los candidatos híbridos más prometedores ante esos estreses abióticos. Los resultados de estos trabajos se presentan en dos capítulos en esta revista. El tercer trabajo se presentó en la última edición del XI Congreso Nacional de Mejora Genética de Plantas (Cáceres 24-26 Septiembre 2026). Se adjunta código QR para su consulta.

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1. Introducción La deficiencia de hierro (Fe) es uno de los trastornos nutricionales más importantes en las plantas ya que este elemento participa en procesos esenciales, como la respiración y la fotosíntesis. A pesar de que el Fe es relativamente abundante en muchos suelos cultivados, su adquisición por parte de las plantas se ve perjudicada por ciertas propiedades del suelo, como el alto contenido de carbonato, que alcaliniza la solución del suelo y reduce su disponibilidad para las plantas (Msilini et al., 2009). Estas condiciones afectan a la mayoría de los cítricos cultivados en la cuenca mediterránea, que frecuentemente desarrollan síntomas de clorosis férrica, principalmente amarillez intervenal en las hojas, retraso en el crecimiento vegetativo, peores rendimientos y frutos de mala calidad. Para prevenir la deficiencia de Fe en frutales se utilizan patrones tolerantes a la clorosis (Jiménez et al., 2008; Ksouri et al., 2007; Molassiotis et al., 2006), probados incluso en cítricos (Castle et al., 2009; Chouliaras et al., 2004; Pestana et al., 2005). Sin embargo, lo realmente interesante es la disponibilidad de patrones que combinen respuestas positivas en varios estreses simultáneamente, como la tolerancia a la clorosis férrica, CTV (virus de la tristeza de los cítricos) y Phytophthora spp., y esto todavía no se ha conseguido. Para este fin, el Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA) lleva a cabo un ambicioso programa de mejora de patrones de cítricos para evaluar el comportamiento de nuevos híbridos frente a diversos estreses abióticos y bióticos, como la salinidad, los encharcamientos o la clorosis férrica (Forner et al., 2009, 2010). Una de las combinaciones de este programa fueron híbridos de Mandarino King (tolerante al bicarbonato y Phytophthora) y Poncirus trifoliata (tolerante al CTV), denominados como genotipos 0501. Como el mejoramiento convencional es muy lento en leñosas, el uso de métodos de selección fisiológicos es una herramienta excelente para la caracterización rápida de la respuesta de nuevos genotipos de cítricos, en este caso, a condiciones de deficiencia de Fe. El principal objetivo de este trabajo fue evaluar el comportamiento de 11 nuevos patrones de cítricos en condiciones deficientes en Fe según varias determinaciones: 1) respuestas fisiológicas de la planta (biomasa, concentración de clorofila y tasa de fotosíntesis); 2) absorción y distribución del contenido de Fe en las plantas; 3) respuesta de acidificación de las raíces; 4) actividad de la enzima clave involucrada en el proceso de reducción ferrosa. Además, se compararon con dos de los principales patrones de cítricos más utilizados en España, conocidos por su diferente tolerancia a la clorosis Fe (Castle et al., 2009): Citrus macrophylla (CM, tolerante) y Carrizo citrange (CC, sensible).

2. Materiales y métodos 2.1. Material vegetal y condiciones de crecimiento Las semillas de once híbridos de Mandarino King × P. trifoliata (en adelante 0501) y el patrón citrange Carrizo, fueron germinados en invernadero en sustrato estéril compuesto de turba, fibra de coco, arena y perlita (50:25:20:5), suplementado con 1,38 g kg−1 superfosfato cálcico y regado dos veces por semana con lo siguiente solución nutritiva: 1,5 mM Ca(NO 3)2, 1,5 mM www.bibliotecahorticultura.com

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KNO3, 1 mM MgSO4, 1,2 mM H3PO4, 20 µM Fe-EDDHA, 23,2 µM H3BO3, 27,2 µM MnSO4·H2O, 3,8 µM ZnSO4·7H2O, 0,27 µM MoO3 y 0,25 µM CuSO4·5H2O. El pH de la solución se ajustó a 6,0 con KOH 1 M o 1 M H2SO4. Las plantas se cultivaron en condiciones de invernadero con luz suplementaria (250 μmol m-2 s-1), 16 h fotoperiodo, Tª noche/día 16-18°C/26-28°C y 80% HR. Después de 8 semanas, las plantas fueron seleccionadas según uniformidad de tamaño y trasplantados individualmente a macetas de plástico opaco de 500 ml con arena gruesa y se regaron dos veces por semana hasta el inicio del experimento con 250 ml de la solución nutritiva anterior (pH 6), drenando el exceso de solución fuera de las macetas. Al cabo de 8 meses, se hicieron dos grupos uniformes de plantas (n = 20 por genotipo y tratamiento) y se regaron con la solución nutritiva anterior suplementada con o sin 20 μM FeEDDHA, para obtener plantas control (Ct) y estresadas (-Fe), respectivamente. Se siguió una distribución aleatoria y con fila perimetral de plantas barrera. El experimento se mantuvo durante 8 semanas. 2.2. Medición de la calidad externa Para cada variedad y estadio de desarrollo, se midió el volumen de 10 semillas mediante desplazamiento de agua en un recipiente graduado, registrando el volumen desplazado en mililitros. Además, se tomaron otras 10 semillas por cada combinación de genotipo y fase de maduración, y se determinó su peso fresco (PF). Posteriormente, las semillas se secaron en un horno a 65 °C durante cinco días y se pesaron nuevamente para obtener su peso seco (PS). A partir de estos valores se calculó la relación PF/PS. 2.3. Concentración de clorofila La concentración de clorofila (Chl) de la hoja (10 discos, Φ = 7 cm) se analizó por extracción en 6 mL de n,n-dimetilformamida a 4ºC durante 24 h, centrifugación durante 15 min a 6.000 g y 4ºC e incubación 1 h en presencia de Na2SO4 . Seguidamente se midió su absorbancia a 664 y 647 nm mediante espectrofotómetro (Lambda 25, PerkinElmer, Shelton, CT, EE. UU.) según Moran y Porath (1980). 2.4. Parámetros de intercambio de gaseoso La actividad fotosintética (tasa de asimilación neta de CO2, Pn), conductancia estomática (gs) y concentración de CO2 interno (Ci) de las hojas se midieron en condiciones relativamente estables (10:00 h-11:30 h) mediante equipo CIRAS-2, sistemas PP, Hitchin, Reino Unido. La radiación fotosintéticamente activa (PAR) en la superficie de la hoja se ajustó a una densidad de flujo de fotones de 1.000 μmol m-2 s-1. Las medidas fueron tomadas en las dos hojas más jóvenes completamente expandidas, considerando el valor medio de las dos hojas como representativo de cada planta individual. 2.5. Análisis de hierro total Se analizó la concentración de hierro en las muestras secas de hojas y raíz, previa extracción (0,5 g PS) por calcinación en horno mufla durante 12 h a 550 ºC y dilución en ácido nítrico al 2% (Hiperpur Panreac, Fe<1 ppb) y baño de ultrasonidos (Fungilab S.A., Sant Feliu de Llobregat, Barcelona, España) durante 30 min a 40ºC. La concentración de Fe total se determinó mediante

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espectroscopía de emisión atómica de plasma acoplado inductivamente (ICP-AES iCAP 6000, Thermo Scientific). 2.6. Actividad reductora de la raíz La capacidad de reducción del sistema radical se analizó mediante análisis de la actividad del enzima Quelato Reductasa Férrica (FC-R), que reduce la forma férrica del Fe a ferrosa, que es la asimilable por la planta. Brevemente, se toman 10 puntas frescas de raíz (0,020 g PF, 5-8 mm), se enjuagan con 0,2 mM CaSO4·2H2O durante 5 minutos y luego se incuban (Tª ambiente y oscuridad) en 10 ml de solución 5 mM MES pH 5,5), 0,3 mM BPDS y 100 µM Fe3+-EDTA. Al cabo de 6 h se mide la absorbancia a 535 nm en un espectrofotómetro (Lambda 25, PerkinElmer, Shelton, CT, EE. UU.). El BPDS forma un complejo rojo estable y soluble en agua con Fe2+ y sólo un complejo débil con Fe3+. La cantidad de Fe reducido se calcula mediante la concentración del complejo Fe2+-(BPDS)3 utilizando un coeficiente de extinción de 22,14 mM-1 cm-1, y se expresa en µmol Fe2+ reducido g-1 raíz PF h-1 (Chaney et al., 1972). 2.7. Acidificación de la raíz La capacidad acidificadora del sistema radical se determina mediante el análisis de la extrusión de protones (H+). Para ello se incuban grupos de 10 plántulas de cada genotipo y tratamiento en 250 ml de solución nutritiva con o sin 20 µM FeEDDHA para las plantas control y -Fe, respectivamente, ajustadas a pH 7,0. Al cabo de 8 h se mide el pH de la solución usando un pHmetro (Consort C531, Turnhout, Bélgica). 2.8. Análisis estadísticos Se comprobó la normalidad y la estadística de las distribuciones de datos. Los análisis se llevaron a cabo mediante análisis de varianza (ANOVA) con Statgraphics Plus, versión 5.1 (Estadística Graphics, Englewood Cliffs, Nueva Jersey). Los valores medios fueron comparados por el método de las diferencias menos significativas (LSD) con un nivel de confianza del 95%.

3. Resultados 3.1. Crecimiento La deficiencia de Fe redujo la biomasa más marcadamente en las plantas de CC (40,8% y 34,2% en parte aérea y sistema radical, respectivamente, Tabla 1) que en CM (31,1% y 18,5%, respectivamente). También se registró una reducción significativa en el peso seco de ambas fracciones en el híbrido 05019 o solo de la parte aérea en 050120 y 050129 –Fe. 3.2. Concentración de clorofila Al final del experimento la mayoría de las plantas desarrollaron síntomas de clorosis en las hojas apicales, reflejado en una reducción significativa del contenido de pigmentos fotosintéticos (Tabla 2). Este decremento fue menor en CM (en torno al 20%) que CC (37,5 y 48,1% en Chl a y Chl b, respectivamente). 050114 presentó una reducción similar al genotipo CM, mientras que los niveles de Chl en las especies 05013 y 050129 aparentemente no fueron afectados por la deficiencia de Fe. La reducción en el resto de los genotipos fue elevada, oscilando entre un 55% y un 75%.

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Poscosecha, Cítricos Tabla 1. Biomasa (PS; en g) y concentración total de Fe (en mg g-1 PS) en parte aérea y sistema radical de híbridos de cítricos regados durante 8 semanas en soluciones con (control, Ct) o sin (-Fe) 20 µM FeEDDHA. Para cada genotipo (n=6), las comparaciones de medias se hicieron con LSD Fisher *P < 0,05. PS: Peso seco; CM: Citrus macrophylla; CC: citrange Carrizo

En general, la reducción de biomasa fue más intensa en la parte aérea que en la raíz lo que se corresponde en un incremento de la relación raíz/parte aérea de entre un 31,9% y un 109,2% en varios genotipos 0501 (05019, 050131, 050120, 050125, 05013, 050110 y 050129, Figura 1).

3.3. Parámetros de intercambio de gases La deficiencia de hierro afectó a los diferentes parámetros de intercambio gaseoso (Tabla 2). En concreto, disminuyó significativamente la tasa fotosintética en varios híbridos (05019, 050131, 050125, 050112 y 05013), incluidos CM y CC. La conductancia estomática (gs) también disminuyó entre un 20,7 y 35,2% en CM, 050120, 050125, 050112 y 050124-B. Por el contrario, la concentración interna de CO2 (Ci) tendió a aumentar en la mayoría de las plantas cultivadas sin Fe. Sólo dos genotipos (050119 y 050120) obtuvieron un valor de Ci significativamente inferior (31,6 y 18,7%, respectivamente) en plantas –Fe que en las Ct.

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Figura 1. Relación de peso seco raíz:parte aérea de híbridos de cítricos regados durante 8 semanas en soluciones con (control, Ct) o sin (-Fe) 20 µM FeEDDHA. Para cada genotipo (n=6), las comparaciones de medias se hicieron con LSD Fisher *P < 0,05. PS: Peso seco; CM: Citrus macrophylla; CC: citrange Carrizo Tabla 2. Concentración de clorofila a y b (Cl a, Cl b; en mmol m-2), fotosíntesis neta (Pn; en mmol CO2 m2 s-1), conductancia estomática (gs; en mmol H 2O m-2 s-1) y concentración interna de CO2 (Ci; en mmol CO2 mol-1) medida en hojas jóvenes completamente expandidas de híbridos de cítricos regados durante 8 semanas en soluciones con (control, Ct) o sin (-Fe) 20 µM FeEDDHA. Para cada genotipo (n=6), las comparaciones de medias se hicieron con LSD Fisher *P < 0,05. PS: Peso seco; CM: Citrus macrophylla; CC: citrange Carrizo

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3.4. Análisis de hierro total Al final del experimento, la concentración de Fe (Tabla 1) en la parte aérea de la mayoría de los genotipos disminuyó significativamente en comparación con sus controles, superando el 40% en CM, 050119, 050120 y 050129 y 050131. Este parámetro no se vio afectado en los híbridos 050125, 05013 y 050124-B –Fe. También se vio afectada negativamente la concentración de Fe en el sistema radical, sobre todo en los patrones CM, 05019, 050125, 050112 y 05013 (entre 1,9 y 2,3 veces inferior a las plantas Ct), siendo 050110 el que registró la mayor bajada (3,5 veces). 3.5. Actividad reductora de la raíz Cuando las plantas fueron irrigadas con la solución -Fe, varios genotipos mostraron un marcado aumento de la actividad FCR en las plantas -Fe con respecto a las Ct (Figura 2). Los mayores valores se observaron en CM y 050114 (160% y 140%, respectivamente). En las especies 05019, 050125, 050110, 050131 y 05013 también aumentó entre un 45 y 94%, mientras que la actividad de este enzima no se vio afectada aparentemente en el resto de las especies estudiadas.

Figura 2. Capacidad de reducción medida como actividad de quelato reductasa férrica (FC-R) (en mmol Fe2+ g-1 FW h-1) en raíces de híbridos de cítricos regados durante 8 semanas en soluciones con (control, Ct) o sin (-Fe) 20 µM FeEDDHA. Para cada genotipo (n=6), las comparaciones de medias se hicieron con LSD Fisher *P < 0,05. PF: Peso fresco; CM: Citrus macrophylla; CC: citrange Carrizo

3.6. Acidificación de la raíz La capacidad de acidificación de las raíces, medida como extrusión de protones, mostró que la reducción del pH comenzó inmediatamente y ocurrió más rápidamente en las plántulas -Fe que en las Ct (Figura 3). Este aumento osciló entre el 26,4% y 84,7% en los genotipos CM, CC, 05019, 050125, 050119, 050131 y 050114, y no hubo diferencias en el resto.

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Figura 3. Capacidad de acidificación medida como protón extruido (en mmol H + g-1 FW) en raíces de híbridos de cítricos regados durante 8 semanas en soluciones con (control, Ct) o sin (-Fe) 20 µM FeEDDHA. Para cada genotipo (n=6), las comparaciones de medias se hicieron con LSD Fisher *P < 0,05. PF: Peso fresco; CM: Citrus macrophylla; CC: citrange Carrizo

4. Discusión La deficiencia de hierro provocó sintomatología típica de clorosis férrica en la mayoría de los genotipos, principalmente coloración amarillenta clorótica en las hojas apicales más jóvenes, acompañado de reducción de la concentración de clorofilas, la fotosíntesis, el crecimiento de las plantas y la concentración de Fe. Este efecto sobre los pigmentos fotosintéticos se ha observado previamente en estudios realizados en melocotón (Molassiotis et al., 2006), vid (Ksouri et al., 2007), A. thaliana (Msilini et al., 2009) y guisantes (Jelali et al., 2010). El efecto de los tratamientos que mejoran la deficiencia de Fe sobre el contenido de clorofilas se ha atribuido al papel del Fe en la formación de algunos precursores de la biosíntesis de Chl (Marschner, 1995). Los tratamientos de privación de hierro redujeron significativamente la fotosíntesis, lo que probablemente esté relacionado con la reducción tanto de la actividad de las enzimas del estroma como del número de tilacoides, lo que reduce la tasa de transporte de electrones y el contenido de pigmentos captadores de luz (Chouliaras et al., 2005). También se vio reducida la conductancia estomática en varias especies con deficiencia de Fe, lo que sugiere una respuesta de la planta para mantener un estado hídrico equilibrado en condiciones de este estrés, como ya se observó en trabajos de cítricos irrigados con bicarbonato (NaHCO3) (Chouliaras et al., 2005). Por el contrario, no se encontró reducción, o incluso aumentó en el valor de gs en hojas de soja deficientes en Fe, lo que atribuían a una pérdida del mecanismo de control estomático (Davis et al., 1986). Nuestros resultados muestran un crecimiento atrofiado de los brotes (expresado como peso seco) en las plantas -Fe, mientras que las raíces fueron menos sensibles al tratamiento. Estas

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diferencias entre la sensibilidad del crecimiento de brotes y raíces a niveles bajos de Fe también se han descrito en otros estudios de deficiencia de Fe directa o inducida por bicarbonato (De la Guardia y Alcántara, 2002; Gharsalli y Hajii, 2002; Lucena et al., 2007; Martínez-Cuenca et al., 2013a,b). Por otro lado, la caída significativa en la concentración de Fe en los brotes y raíces de las plántulas de -Fe, indica que la falta de Fe en el medio limita la absorción de Fe y, en consecuencia, el transporte de Fe desde las raíces a los brotes. Esto correlaciona con otros estudios en cítricos (Martínez-Cuenca et al., 2013 a,b), olivo y melocotón (De la Guardia y Alcántara, 2002; Gharsalli y Hajji, 2002), y se ha asociado con la inmovilización de Fe dentro del apoplasto de la raíz, probablemente debido al alto pH apoplásmico que restringe la translocación de Fe a la parte aérea (Kosegarten y Koiro, 2001; López-Millán et al., 2001; Zribi y Gharsalli, 2002). Para prevenir la deficiencia de Fe, las plantas basadas en la Estrategia I responden mejorando la acidificación del apoplasto de la raíz e induciendo la reducción enzimática del Fe3+ de la raíz (Dell´Orto et al. 2000; Donnini et al., 2009). En nuestro estudio, 1) hubo excreción de H+ en ambos tipos de raíces (-Fe y Ct), aunque fue más intensa en las plantas estresadas, y con diferencias entre genotipos. En cítricos, Martínez-Cuenca et al. (2013a) observaron que el pH de la solución nutritiva disminuía en respuesta a la deficiencia de Fe en especies más tolerantes a la clorosis de Fe, mientras que no ocurrió así en especies menos tolerantes como el CC. Y 2), la actividad FC-R de la raíz se indujo en varios genotipos -Fe, aunque este efecto fue más marcado en CM y 050114. Se ha observado una estrecha relación entre la capacidad de reducción de quelatos de Fe de las raíces y la tolerancia a la clorosis de Fe en genotipos de plantas leñosas (Gogorcena et al., 2004), incluidos los cítricos, donde la actividad FC-R de la raíz se indujo en mayor medida en especies tolerantes a la clorosis que en especies susceptibles (MartínezCuenca et al., 2013a; Pestana et al., 2001). En base a los resultados obtenidos, concluimos que, de manera similar al patrón CM, en condiciones de deficiencia de Fe, las especies 05013, 05019, 050110, 050114, 050125 y 050131 presentaron posible tolerancia a condiciones de deficiencia de Fe en invernadero. Este trabajo permitió un screening inicial exhaustivo para caracterizar nuevos genotipos tolerantes a la deficiencia de Fe y se deben realizar más experimentos para determinar su comportamiento en condiciones de campo, y especialmente para determinar su influencia en las variedades comerciales cuando se injertan.

Agradecimientos Este trabajo ha sido financiado por el Instituto Nacional de Investigación y Tecnología Agraria y Alimentaria (RTA2019-52201-B), Generalitat Valenciana y fondos FEDER.

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Bibliografía Castle, W. S., Nunnallee, J., Manthey, J. A. (2009). Screening citrus rootstocks and related selections in soil and solution culture for tolerance to low iron stress. HortScience, 44, 638–645. Chaney, R. L., Brown, J. C., Tiffin, L. O. (1972). Obligatory reduction of ferric chelates in iron uptake by soybeans. Plant Physiology, 50, 208–213. Chouliaras, V., Dimassi, K., Therios, I., Molassiotis, A., Diamantidis, G. (2004). Root reducing capacity, rhizosphere acidification, peroxidase and catalase activities and nutrient levels of Citrus taiwanica and Citrus volkameriana seedlings under Fe deprivation conditions. Agronomie, 24, 1–6. Chouliaras, V., Therios, I., Molassiotis, A., Patakas, A., Diamantidis, G. (2005). Effect of iron deficiency on gas exchange and catalase and peroxidase activity in citrus. Journal of Plant Nutrition, 27, 2085–2099. Davis, T., Jolley, V., Walser, R., Brown, J., Blaybock, A. (1986). Net photosynthesis of Fe-efficient and Fe-inefficient soybean cultivars grown under varying iron levels. Journal of Plant Nutrition, 9, 671–681. De la Guardia, M. D., Alcántara, E. (2002). A comparison of ferric chelate reductase and chlorophyll and growth ratios as indices of selection of quince, pear and olive genotypes under iron deficiency stress. Plant and Soil, 241, 49–56. Dell’Orto, M., Santi, S., De Nisi, P., Cesco, S., Varanini, Z., Zocchi, G., Pinton, R. (2000). Development of Fe-deficiency responses in cucumber (Cucumis sativus L.) roots: Involvement of plasma membrane H⁺-ATPase activity. Journal of Experimental Botany, 51, 695–701. Donnini, S., Castagna, A., Ranieri, A., Zocchi, G. (2009). Differential responses in pear and quince genotypes induced by Fe-deficiency and bicarbonate. Journal of Plant Physiology, 166, 1181–1193. Forner-Giner, M. A., Primo-Millo, E., Forner, J. B. (2009). Performance of Forner-Alcaide 5 and Forner-Alcaide 13, hybrids of Cleopatra mandarin × Poncirus trifoliata, as salinitytolerant citrus rootstocks. Journal of the American Pomological Society, 63, 72–80.

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Poscosecha, Cítricos

Forner-Giner, M. A., Llosá, M. J., Carrasco, J. L., Pérez-Amador, M. A., Navarro, L., & Ancillo, G. (2010). Differential gene expression analysis provides new insights into the molecular basis of iron deficiency stress response in the citrus rootstock Poncirus trifoliata (L.) Raf. Journal of Experimental Botany, 61, 483–490. Gharsalli, M., Hajji, M. (2002). Comparison of physiological responses of peach and almond seedlings to iron deficiency. Journal of Plant Nutrition, 25, 1139–1154. Gogorcena, Y., Abadía, J., Abadía, A. (2004). New technique for screening iron-efficient genotypes in peach rootstocks: Elicitation of root ferric chelate reductase by manipulation of external iron concentrations. Journal of Plant Nutrition, 27, 1701– 1715. Jelali, N., Dell’Orto, M., Rabhi, M., Zocchi, G., Abdelly, C., Gharsalli, M. (2010). Physiological and biochemical responses of two cultivars of Pisum sativum to iron deficiency conditions. Scientia Horticulturae, 124, 116–121. Jiménez, S., Pinochet, J., Abadía, A., Moreno, M. A., Gogorcena, Y. (2008). Tolerance response to iron chlorosis of Prunus selections as rootstocks. HortScience, 43, 304–309. Kosegarten, H., Koyro, H. W. (2001). Apoplastic accumulation of iron in the epidermis of maize (Zea mays) roots grown in calcareous soil. Physiologia Plantarum, 113, 515–522. Ksouri, R., Debez, A., Mahmoudi, H., Ouerghi, Z., Gharsalli, M., Lachaâl, M. (2007). Genotypic variability within Tunisian grapevine varieties (Vitis vinifera L.) facing bicarbonateinduced iron deficiency. Plant Physiology and Biochemistry, 45, 315–322. López-Millán, A. F., Morales, F., Abadía, A., Abadía, J. (2001). Iron deficiency-associated changes in the composition of the leaf apoplastic fluid from field-grown pear (Pyrus communis L.) trees. Journal of Experimental Botany, 52, 1489–1498. Lucena, C., Romera, F. J., Rojas, C. L., García, M. J., Alcántara, E., Pérez-Vicente, R. (2007). Bicarbonate blocks the expression of several genes involved in the physiological responses to Fe deficiency of Strategy I plants. Functional Plant Biology, 34, 1002– 1009.

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Nuevos híbridos de mandarino King – I, Selección de patrones tolerantes a clorosis férrica

Martínez-Cuenca, M. R., Forner-Giner, M. A., Iglesias, D. J., Primo-Millo, E., Legaz, F. (2013a). Strategy I responses to Fe deficiency of two citrus rootstocks differing in their tolerance to iron chlorosis. Scientia Horticulturae, 153, 56–63. Martínez-Cuenca, M. R., Iglesias, D. J., Forner-Giner, M. A., Primo-Millo, E., Legaz, F. (2013b). The effect of sodium bicarbonate on plant performance and iron acquisition system of FA5 citrus seedlings. Acta Physiologiae Plantarum, 35, 2845–2853. Marschner, H. (1995). Mineral nutrition of higher plants (2nd ed.). Academic Press. Molassiotis, A., Tanou, G., Diamantidis, G., Patakas, A., Therios, I. (2006). Effects of 4-month Fedeficiency exposure on Fe reduction mechanism, photosynthetic gas exchange, chlorophyll fluorescence and antioxidant defence in two peach rootstocks differing in Fe-deficiency tolerance. Journal of Plant Physiology, 163, 176–185. Moran, R., Porath, D. (1980). Chlorophyll determination in intact tissues using N,Ndimethylformamide. Plant Physiology, 65, 478–479. Msilini, N., Attia, H., Bouraoui, N., M’rah, S., Ksouri, R., Lachaâl, M., Ouerghi, Z. (2009). Responses of Arabidopsis thaliana to bicarbonate-induced iron deficiency. Acta Physiologiae Plantarum, 31, 849–853. Pestana, M., David, M., de Varennes, A., Abadía, J., Araújo-Faria, E. (2001). Responses of ‘Newhall’ orange trees to iron deficiency in hydroponics: Effects on leaf chlorophyll, photosynthetic efficiency, and root ferric chelate reductase activity. Journal of Plant Nutrition, 24, 1609–1620. Pestana, M., de Varennes, A., Abadía, J., Araújo-Faria, E. (2005). Differential tolerance to iron deficiency of citrus rootstocks grown in nutrient solution. Scientia Horticulturae, 104, 25–36. Santi, S., Cesco, S., Varanini, Z., Pinton, R. (2005). Two plasma membrane H⁺-ATPase genes are differentially expressed in iron-deficient cucumber plants. Plant Physiology and Biochemistry, 43, 287–292. Santi, S., Schmidt, W. (2009). Dissecting iron deficiency-induced proton extrusion in Arabidopsis roots. New Phytologist, 183, 1072–1084.

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Poscosecha, Cítricos

Zribi, K., & Gharsalli, M. (2002). Effect of bicarbonate on growth and iron nutrition of pea. Journal of Plant Nutrition, 25, 2143–2149.

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