1. L do ch
t i.
]. V , nó tham gia
.
3
Vitamin B2 các men oxidase,
B2
cá...Tuy nhiên
Thiamin 1,4-2,2mg (%), Riboflavin 6,7-9,0mg (%), Niacin 60,6-73,3mg (%), Biotin, axit ascorbic 92-144mg (%), axit plantothenic 21,1 33,3mg (%) và axit folic 1,2 1,4mg /100g [26]. 3, B2 (HPLC)
3
trong
2
. Xây d ng quy tr nh phân t ch vitamin D3, B2 b cao HPLC, t x nh h ng c a ch ng trong m t s
+
pd
kh o s
ng vitamin D3, B2 trong m t s
lo i ng v ph m vi nghiên c u C cm c thu th p c c ch c b o qu n trong t l nh 40 C .
a bàn th nh ph Vinh.
Hình 1.
Hình 1.
Hình 1.
Hình 1.6.
2
Hình 1.
Ganoderma lucidum)
Hình 1.7.
3
04 (Ganoderma nigrolucidum)
1.1.1.
]. 1.1.2.
B1), riboflavin (vitamin B2), niacin, vitamin (Hexagonia apiaria)
B6, axit pantothenic, folate và vitamin B12
phân tích [19]. 1.1.3.
Hình 1.
(Amauroderma schmburgkii)
].
6
4
5
và folate.
1.1.4.
sáng. Niacin và vitamin B6
]. 1.2. Vitamin D 1.2.1. Gi i thi tan 2
vitamin D2
7 3 3
và
vitamin D2
Hình 1.11.
ánh
1.2.2.
[18].
sâu[20][17]
[17]. ,
3 thán
[17][20][30].
6
7
Vitamin D c 1.3. Vitamin B2 1.3.1. Gi i thi Vitamin B2 2920 Vitamin B2
[17] .
-
.
1.2.3.
2 2
riboflavin, lactoflavin,ovoflavin 17H20N4O6
-
S t ng h
tr nh t ng h p di n
-
. lumichrome. 2
t ra 18IU vitamin D3[21] 3
2
1.2.4. Tình enzim xúc tác cho các quá trình oxy hóa- adenin- dinucleotit (FAD). 1.3.2. -
2
: Vitamin B2
2mcg/100g.
8
9
: Vitamin B2 B3, B6
-
-
: Vitamin B2
hình thành t -
: Vitamin B2
ác
2
vitamin B2 2. 2.1. 2.1.1.
: Vitamin B2 Vitamin B2
-
B2 : Vitamin B2 B2
- Vitamin B2 1.3.3. Vitamin B2
.
2
2.1.2. 1.1:
.
[19]
2
B2 (mg/100g) 4,64
là protein
3,5
[2]. 2.1.2.1. Protein
1
Hàng
0,7 Phomat
0,5 amin.
0,47 Cá thu
a 96
0,4 là casein và whey:
0,3 0,17
mixen.
0,13 2
làm giàu vitamin B2 2
-mai.
2
2.1.2.2. Lipit
FMN và
10
11
98%.
2.1.3.1.
khác nhau.
-6 tháng, 6-12 tháng, 1-2-3
2.1.2.3. 2.1.3.2. Lactos
a Khi lactose lên ramen hóa k
. protein
2.1.2.4. phospho
, hòa.
canxi
2.2. 2.2.1. protein
. D. 2.1.3. 2.2.2.
Riêng
12
13
g
úc ].
-
Trong lòng
-
Biotin là vitamin B8 2.3.3.
-2,2mg (%), Riboflavin 6,7-9,0mg (%), Niacin 60,6-73,3mg (%), Biotin, axit ascorbic 92-144mg (%), axit plantothenic 21,1
33,3mg (%) và axit folic 1,2
2.3. 2.3.1. Thu ]. 1.2.
].
h
Thiamin (B1)
1,4mg
4,8-8,9mg
Ribiflavin (B2)
1,5mg
3,7-4,7mg
Niacin
18,2mg
42-108mg
Photpho
450mg
708-1348mg
9mg
15-17mg
450mg
33-199mg
2mg
12-22mg
Canxi
2.3.2.
14
15
2.4.2. 2.3.4. p. -
F1
F2
15.00
F3 ba
(1983) [21]. khác nhau thì F1 và F2 là khác nhau.
2.4.3.
i. 2.4. 2.4.1.
) atography). (high performance liquid chromatography).
g
-
16
-
17
6
5
3
2.4.4.
1
2 4
8 7 Hình 1.13.
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Hình 1.12.
8. -
-
18
19
C là n
-
k
.
-
-
0.1-9.999 ml/phút.
-
-
- VIS): 190 -
-
-
-
-30cm, -
-10mm. o
. -
.
. A = k.C
: A
20
21
-
2.4.5.
2.4.5.1. -
2...
n tích, HPLC.
quang (v
UV - VIS thì dung
-
.
cacbon vòng (Phenyl-
-
ng: Ngoài các dung môi chính thì trong thành tách RP-
2.4.5.2.
cao. 2.4.5.3. Detector
: A = kC
. : -
.
22
23
VÀ 2.1. 0,001g. âm. - Bình nón 250ml. 5, 10, 50, 100, 250ml. - Pipet 5ml, 10ml, 20ml. - Micropipet.
d vùng UV-
-
rong phân -
-
[15].
.
2.1.2. - Metanol ( Merk) - n-hexan (Merk) - Dietyl ete (Merk)
2.4.6.
- Chu n vitamin D3 - Axetonitril (Merk) - Etanol 960 - Axit ascobic (Merk) - KOH, NaOH CH3COONa 0,05M - Dung môi Methanol (Merck) - Men amilase - Acid axetic (Merck) 2 cc ion. T t c c c h a ch t c n l u thu c lo i tinh khi t phân t ch.
có
.
chuyên l
-
2.3.
24
25
D ch chi MeOH.
2.3.1. Vitamin D3 2.3.1.1.
3
có
2.3.1.4. metanol.
2.3.1.2.
ng tích.
3
- C t s c ký: c t s c ký o RP-18 dòng: 1,08 ml/phút. -T - Nhi -
ng: 100% metanol : 300C
2.3.2. Vitamin B2 2.3.2.1. là 0,5ppm; 10ppm; 50ppm 2.3.2
2.3.1.3. H nh pg m1 5 thêm 4ml natri ascobat (17,5 g ascobic+100 ml NaOH) + 50 ml etanol + 3 g KOH, cho vào bình c votex trong 30 phút. Ti n h 0 75 nhi ph ng, thêm v c và i 50 ml h n h p dietyl ete : n-hexan = 1:3. D ch chi t thu c chi t l i b r a b ng n khi trung t nh.
26
2
cho phép
100ppm.
2
2.3.2.3.
27
o
3.1.2.
3
o
2.3.2.4. -
3COONa
0,05M: MeOH = 70:30(V/V)
18.
Hình 3.1.
3.1. Vitamin D3 3.1.1.
D3 0,5ppm; 1ppm; 5 ppm; .
D3 10ppm; 25ppm; 50ppm; 100ppm. 3.1
3
3
m
0,5
12,68392
12,73691
12,68372
1
22,46859
22,46857
22,39302
5
133,52037
133,52621
133,48506
10
253,37396
253,41572
253,37403
25
594,15656
594,15708
594,23649
50
1296,45618 1296,39052 1296,45217
100
2582,10376 2582,07592 2582,13294
b
R2
Hình 3.2.
25,83861
28
- 6,66622
3
0,99979
29
Hình 3.3.
3
30
Hình 3.4.
3
Hình 3.5.
3
31
Hình 3.8
vitamin D3
3.1.3. pháp phân tích 3.1.3.1. Hình 3.6.
3
l ch chu n c a tín hi u
nhau 0,5ppm; 1ppm; 3 là 0,0037ppm. 3.1.3.2.
Hình 3.7.
3
3
nhau 0,5ppm; 1ppm; 5ppm; 10ppm; 25ppm; 50ppm; 100ppm là 0.0111ppm. 3
sau:
32
33
3.1.4.
3
.
3
vitamin D3(ppm). tính
3
C = (Co/m).Vdm.f - Co - Vdm
3 3
Hình 3.10.
Hình 3.9. Hình 3.11.
34
35
ch chu n v
m, 10ppm, 25ppm, 50ppm, 100ppm. l ch chu
3.3. 3 (C)
ppm Xtb
3
STT
Co(ppm) 28,36762
726,31354
709,19050
2
1,76752
39,00392
44,18800
3
0,88543
16,21220
22,13575
1,33277
27,77074
33,31925
2,04891
46,27463
51,22275
dielac mama
5
709,19050
709,59135 709,62427 709,46871
0,2415
0,0340
44,18800
44,15952
44,19092
44,17948
0,0173
0,0392
22,13575
22,13362
22,12529
22,13155
0,0055
0,0250
33,31925
33,33273
33,31759
33,32319
0,0083
0,0249
51,22275
51,24297
51,25265
51,23946
0,0153
0,0298
24,67150
24,67093
24,66358
24,66867
0,0044
0,0179
15,76250
15,76728
15,76494
15,76490
0,0024
0,0152
mama
1
4
C(ppm)
6
0,98686
18,83301
24,67150
7
0,63050
9,62506
15,76250
optimum vinamilk
3.1.5. 3.1.5.1.
x l th ph p, ch -
nh gi k t qu th c nghi m sai s v c theo cĂ´ng th c sau: tb
CV(%)
alpha gold
HĂŹnh 3.12. 3.2.
SD
l pl ic
=
D= : CV% (RSD) =
36
37
-
3
l ch chu n:
= 0,0024
= 709,46871 H s bi n thiên: l ch chu n:
= 0,2415
N
H s bi n thiên: -
3.1.5.2.
vitamin D3
Hi u su
= 44,17948 l ch chu n:
= 0,0173
H s bi n thiên: -
3
= 22,13155 l ch chu n:
= 0,0055 Cm+c Cm
H s bi n thiên: -
Cc
3
= 33,32319 3.4 K
l ch chu n:
= 0,0083
H s bi n thiên: STT
= 51,23946 l ch chu n:
= 0,0153
Cm+c- Cm
Cc(ppm)
H (%)
22,13575
4,85127
5
97,03
26,98361
22,13602
4,84759
5
96,95
26,98623
22,13629
4,84994
5
96,99
Cm+c
Cm
1
26,98702
2 3
3
H s bi n thiên: -
3
Htb (%) =
= 24,66867 l ch chu n:
1 n
n
X
96,99 %
i 1
= 0,0044 3.2. Vitamin B2 3
bi n thiên: -
3
2
= 15,76490
38
39
3.5.
2
m
b
R2
ppm
3.2.2.
0,5
57,8243
57,4576
57,9443
10
1160,9643
1160,7951
1161,0254
50
5909,9194
5909,3551
5905,7642
118,37
-10,963
0,9999
2
Hình 3.13.
Hình 3.14.
2
Hình 3.15.
2
2
2
Y = 118,37x + -10,963
40
41
tích pic vitamin B2 2
2
Co
2
Vdm 2
Hình 3.16.
2
3.2.3 3.2.3
l ch chu n c a tín hi u Hình 3.17.
2
3.2.3 LO
2
nhau 0,5ppm; 10ppm và 50ppm là 0,018 ppm 3.2.4 2
42
43
3.6.
2
Co (ppm) HKG 406
C ( ppm)
0,22743
10
50
20,21801
0,21174
10
50
18,28830
1,1371 1,0587
HKG 401
0,51756
10
50
55,89994
1,2939
TH 04
0,10458
10
50
5,10844
0,5229
01
0,15005
10
50
10,70119
0,7502
3.2.5. 3.2.5
Hình 3.18.
Xi
3.7.
TT
HKG 406
1
10
1,1371
10
1,0587
10
1,2939
10
0,5229
10
0,7502
2
10
1,1242
10
1,0413
10
1,3082
10
0,5073
10
0,7721
3
10
1,1058
10
1,0625
10
1,2715
10
0,5486
10
Hình 3.19.
HKG 401
tích
tích
tích
01
tích
1,2912
tích
1,0541
SD
0,015
0,011
0,018
0,02
0,02
CV
1,33%
1,04%
1,39%
3,80%
2,66%
vitamin B2 = 1,1223
45
0,5262
0,7306
1,1223
-
44
TH 04
0,7509
l ch chu n:
= 0,015
3.8.
H s bi n thiên:
TT
= 1,0541 l ch chu n:
= 0,011
Cm+c - Cm
1
2,0372
1,0587
0,9785
1
97,85%
2
2,0125
1,0413
0,9712
1
97,12%
3
2,0361
1,0625
0,9736
1
97,36%
2
= 97,44%
= 1,12912 l ch chu n l ch chu n:
= 0,372
= 0,018 H s bi n thiên:
-
= 0,381%
2
= 0,5262 l ch chu n:
2
= 0,02
H s bi n thiên: -
g vitamin B2 = 0,7509 l ch chu n:
= 0,02
H s bi n thiên:
3.2.5
H Cm+c Cm Cc
46
%R
Cm
H s bi n thiên: -
Cc (ppm)
Cm+c
2
47
K 3 2
vitamin D3, B2 + Vitamin D3 có: LOD là 0,0037 và LOQ là 0,0111. + 3 trong :
[4]. [5]. Hoàng Kim Anh, [6]. [7].
S T
00ppm
S
alpha gold là 22,13575ppm [8]. Lê Lý Thùy Trâm (2007),
S S
.
[9].
t dielac optimum là 51,22275ppm
[10]. [11].
S + Vitamin B2 có LOD là 0,0504 và LOQ là 0,018. + 2 N
[1]. (2008), [2]. Lâm Xuân Thanh, [3].
. DHVinh
: [12]. [13].
87ppm
ác vitamin B1, B2, B3, B6, B12
N N N -
3,
. 3
2
3,
i
trong B2
B2
[14]. [15].
. Hóa sinh I . NXB Nông
[16]. Angelika Gratzfeld-Huesgen (1997). HPLC analysis of viatmins in tables using HPLC. Agilent technologies, publication number 5966 -0639E [17]. DeLuca Hector F;(2004), Overview of general physiologic features and functions of vitamin D, American Society for Clinical Nutrition, USA [18]. [19]. George F.M Ball (2006). Vitamins in foods Analysis, Bioavailability, and Stability. Taylor & Francis group [20]. [21]. Bilal Ahmad Wani, R.H Bodha, and A.H.Wani (2010). Nutritional and medicinal imfortance of mushrooms. Journal of medicinal Plants research, vol 4 (24), pp 2598- 2604 [22]. Chang S.T (2008). Mushrooms as Functional Foods. Wiley
48
49
[23]. Chang S.T and Miles P.G (2004). Mushroom cultivaton, nutritional value, medicinal effect, and enviroment impact. Second edition. CRC press p.1-41
-
-
[24] David A. B (2003). Nutritional biochemistry of the vitamins. Second edition,
Cambridge university press [25]. vitamins
Handbook of Francis group
[26].Kakon A.J, Md. Bazlul Karim Choudhury, Shusmita Saha (2012). Mush is an ideal food supplement. J.Dhaka National Med.Cod.Hoss.
:
[27]. Regina Prado Zanes Furlani, Helena T.G (2008). Analytical nutritional and Clinical Methods Vitamin B1 and B2 contents in cultivated mushrooms. Food chemistry [28]. AOAC 981.17 (1982), Vitamin D in Fortified Milk and Milkpowder - Liquid Chromatographic Method [29]. AOAC 992.26, (1995),Vitamin D3 (cholecalciferol) in ready-to-feed milk-based infant formula. Liquid chromatographic method [30]. A. Catharine Ross et al, (2011), Dietary Reference Intakes For Calcium And
Msv: 1052043927 Msv: 1052043941
Khóa : 51 Ngành : 1.
3
vitamin B2
Vitamin D, National Academy of Sciences, Washington, D.C [31].
Trang web: [32]. http://idoc.vn/tai-lieu/xac-dinh-ham-luong-vitamin-d-d2-va-d3-trong-thuc-pham-bangphuong-phap.html [33]. http://www.hoahoc.org [34]. http://vi.wikipedia.org/wiki/Vitamin_D [35]. http://xetnghiemdakhoa.com/diendan/showthread.php?tid=820 [36]. http://123doc.org/document/927970-xac-dinh-ham-luong-vitamin-b2-bang-phuongphap-trac-quang.htm [37]. http://123doc.org/document/1342713-cac-phuong-phap-xac-dinh-ham-luong-vitamintrong-thuc-pham.htm [38].
Ngày ho
: : :
4 4 5
)
50
51
-
-
-
-
Msv: 1052043927 Msv: 1052043941
Msv: 1052043927 Msv: 1052043941 Khรณa:
51
Khรณa: 51 ThS.
1. 1. ............ .... 2.
......................................................
1
HPLC Th.s
High Performance Liquid Chromatography
NP HPLC
RP HPLC -
LOD LOQ UV VIS
Ultraviolet
IU
Võ
FMN
Flavin mononucleotide
FAD
Flavin adenine dinucleotide
ELSD MeOH
2
Metanol
3