Kỹ thuật trong sắc ký Bài 1. Sắc ký pha thuận và pha đảo ( thuộc sắc ký phân bố) a, Chọn pha tĩnh và pha động: Trong sắc ký có 3 thành phần tương tác với nhau: Pha tĩnh, pha động và chất phân tích. Để phân tích được chất cần lực chọn điều kiện để cân bằng tương tác giữa 3 thành phần này. Người ta dực chủ yếu vào lực tương tác -
Với pha tĩnh: Dựa vào nhóm thế R của dẫn chất siloxan
-
Với pha động: Dựa vào độ phân cực, độ nhớt, giới hạn đo,…
-
Với chất phân tích; Dựa vào nhóm chức
Hydrocacbon mạch thẳng < olefin < hydrocacbon thơm < dẫn chất halogen < sunfid < ete < dẫn chất nitro < este ≈ andehyd ≈ xeton < ancol ≈ amin < sunfo < sunfoxid < axit cacboxylic < nước Nguyên tắc lựa chọn: 1. Độ phân cực của chất phân tích hợp với độ phân cực của pha tĩnh và khác xa độ phân cực của pha động 2. Độ phân cực của chất phân tích hợp với độ phân cực của pha động và khác nhiều với độ phân cực của pha tĩnh Tính chất của 1 số dung môi dùng trong sắc ký lỏng Giới hạn dưới
Chỉ số
Điểm sôi
Độ nhớt
Độ phân cực
đo UV (nm)
khúc xạ
(oC)
CP, 25oC
(Theo Snyder)
n-hexan
190
1,372
69
0,3
0,1
Benzen
280
1,498
80
0,6
2,7
Metylen clorit
233
1,421
40
0,4
3,1
n-propanol
240
1,385
97
1,9
4,0
Tetrahydrofuran
212
1,405
66
0,46
4,0
Etyl axetat
256
1,370
77
0,43
4,4
Clorofom
245
1,443
61
0,53
4,1
Tên dung môi
1