Aceite para publicação em 18 de novembro de 2015.
Protocolo experimental Reprodução nos peixes: maturação de gónadas e gâmetas
Enquadramento Teórico O conhecimento do ciclo de maturação das gónadas e do estado de maturação dos gâmetas peixes é útil para avaliar parâmetros de fertilidade, disfunções do desenvolvimento sexual, e alterações da razão entre sexos. Por esta razão é frequentemente incorporado em programas de monitorização, sendo útil também numa perspetiva de gestão de pescas. A análise de preparações histológicas de gónadas de peixe proporciona este tipo de informação. Este tipo de abordagem permite pela análise da morfologia das gónadas a identificação do sexo, sendo que as gónadas de macho e fêmeas são diferentes. Além disso, durante a maturação das gónadas até á reprodução, ocorrem alterações que são de fácil identificação e classificação por análise histológica.
Objetivos Esta atividade experimental tem por objetivos a análise e observação de preparações histológicas de gónadas de peixes estuarinos ou marinhos (e.g., solha e tainha) para identificação do sexo do animal e dos diferentes estados de maturação das suas gónadas. Este protocolo enquadra-se nas Áreas Curriculares de Biologia e Geologia (11º ano) e de Biologia (12º ano) do Ensino Secundário.
Material
Microscópio ótico
Preparações histológicas (fornecidas pelo CIIMAR para o período da experiência)
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Procedimento 1.
Escolher aleatoriamente algumas lâminas para observação.
2. Colocar uma lâmina no microscópio ótico, focar com a objetiva de menor ampliação (4x) e identificar o sexo do animal. 3. Escolher um campo de visualização e focar com uma objetiva de maior ampliação (10x ou 20x) e, se necessário, com a objetiva de 40x. 4. Identificar o estado de maturação com base na identificação dos diferentes estádios de desenvolvimento observados (ver figuras 1 a 3). 5. Registar as observações efetuadas na folha de registo da atividade.
Nota: A classificação do estado de maturação deve ser feita com base nos tipos celulares mais frequentes em cada lâmina.
Estádios de maturação As figuras 1 a 3 ilustram alguns estados de maturação de gónadas e gâmetas de macho e fêmea de peixe que se podem observar nas lâminas fornecidas.
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Figura 1: Microfotografias de testículo de peixe . Espermatogénese inicial (b e e), espermatogénese intermédia (c e f), e espermatogénese final (d e g). Observam-se um espermatogónia tipo a (Spg a), uma espermatogónia tipo b (Spg b), espermatócitos primários (Spc I), espermatócitos secundários (Spc II), espermatídeos (Spt), e espermatozóides (Spz).
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Ferreira, F.; Santos, M.M.; Reis-Henriques, M.A.; Vieira, N.M.; Monteiro, N.M. 2011. The annual cycle of spermatogenesis in the shanny, Lipophrys pholis, a recently proposed sentinel species for pollution monitoring. Ichthyological Research 58: 360-365.
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Figura 2: Microfotografias de ovário de peixe onde se pode observar a oogénese inicial (E e H), oogénese intermédia (F e I) e oogénese final (G e J)
Figura 3: Microfotografias de ovário de peixe onde se pode observar as estruturas ou células seguintes 2: oogónia (Oog), oócito perinuclear (PnO), núcleo (N), oócito cortico-alveolar (Ca), zona radiata (Zr), vitelo (Yg).
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Ferreira, F.; Santos, M.M.; Reis-Henriques, M.A.; Vieira, N.M.; Monteiro, N.M. 2012. The annual cycle of oogenesis in the shanny, Lipophrys pholis (Pisces: Blenniidae). Scientia Marina 76(2): 273-280
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Reprodução nos peixes: maturação de gónadas e gâmetas
Registo de Resultados 1.
Indica qual o objetivo do estudo.
2. Quantas lâminas observaste? _______
3. Em face do observado ao microscópio preenche a tabela seguinte.
Tabela 1: Identificação do estado de maturação das células de gónadas de peixes
Nº da Lâmina
Sexo Animal
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Estado de Maturação
Tipos de Células Identificados